保存条件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室温保存。注意事项:由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于96孔板周围一圈容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS,水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。MTT溶剂在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后为黄色,需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒的重要性。上海哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒购买
EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。本试剂盒反应简单、检测灵敏度高。本试剂盒基于简单高效的点击反应,无需DNA变性,只需少量的小分子叠氮化物探针即可非常有效地标记出掺入的EdU,并且可以检测到单个细胞的增殖情况。本试剂盒使用便捷、兼容性好。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。上海哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒供应商EdU细胞增殖检测试剂盒去哪买?
具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相应一抗:请您提供质量保证的一抗(或委托我公司准备)。抗体的使用量通过预实验后进行确认,原则上不回收使用一抗。3、阳性对照样品(尽量提供)。4、相关文献(可选)。注:若要检测磷酸化蛋白,请在2-3个月内进行,因为长时间保存的样品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而检测不到磷酸化条带。五、提交给客户结果1、预实验显色结果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),预实验采取3个一抗稀释度,选取部分实验样本。2、正式实验显色结果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。3、完整实验报告。六、服务项目说明1、提供的蛋白量与待检测的目的蛋白数量有关,蛋白数量增加相应的样品量也要增加。2、每张膜样品数量为1-8个,不足8个以8个收取。9-16个样品为2张膜,17-24个样品为3张膜;以此类推。举例:7个样品,1个目的蛋白,算1张膜;有9个样品,1个目的蛋白,算2张膜;7个样品,2个目的蛋白,算2张膜,有9个样品,2个目的蛋白,算4张膜。注:以上为一般算法。如果客户样品数量需要按照组别等来进行上样时,需要重新确定每张膜的上样量及膜的张数。3、选择部分样品进行预实验,参考目的蛋白一抗说明书进行3个稀释度的预实验。
摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ulTritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;染色反应液组分500ul1ml2ml5mlIX反应缓冲液430ul860ulmlml催化剂溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA红色荧光溶液ulul5ulul缓冲添加剂50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30分钟。(e)弃染色反应液,加入300ulTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次,每次10分钟;(f)弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次5分钟。DNA染色(a)将Hoechst33342用PBS溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室温避光孵育20-30分钟后,弃染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗细胞两次,去掉洗液。EdU细胞增殖检测试剂盒在社会上的重要性。
与BrdU方法相比,EdU检测方法无需DNA变性,无需抗原修复,无需抗原抗体反应,更简单、更灵敏、更快速、更准确,是细胞增殖检测的比较好选择。更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整;更简单--无需抗原抗体反应,基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,反应单需要几分钟;更灵敏--无需抗体,检测染料单为BrdU抗体的1/500,更容易扩散,即使单个增殖细胞也能准确检测;更快速--无需过夜,省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤,完成整个检测周期单需2.5小时;更兼容--对样品几乎无损伤,更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征。使用EdU细胞增殖检测试剂盒的好处有哪些?上海哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒供应商
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EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,分子量很小,在动物体内能够迅速扩散到各种组织和中,并渗入正在复制的DNA分子,通过基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可简单、快速、准确地检测出细胞增殖情况。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法用量小得多,十分之一的用量即可获得与BrdU检测试剂盒相同甚至更好的检测结果,而且小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间需几分钟,不需要DNA变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育,能够更好地保护细胞形态,更简单、更灵敏、更快速、更准确。上海哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒购买
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